Limita de cuantificare cu zece sigme. Limita de cuantificare. Cuantificarea ingredientelor farmaceutice active

MINISTERUL SĂNĂTĂȚII FEDERAȚIEI RUSII

ARTICOLUL FARMACOPEAN GENERAL

Validarea metodelor analitice OFS.1.1.0012.15

Introdus pentru prima dată

Validarea metodei analitice este o dovadă experimentală că o metodă este adecvată scopului propus.

Prezenta monografie generală pentru farmacopee reglementează caracteristicile metodelor analitice, determinate în scopul validării acestora, precum și criteriile corespunzătoare pentru adecvarea metodelor validate destinate controlului calității produselor medicamentoase: substanțe farmaceutice și medicamente.

Metodele de determinare cantitativă, inclusiv metodele de determinare a impurităților și metodele de determinare a limitei de conținut, sunt supuse validării. Tehnicile de autentificare sunt validate, dacă este necesar, pentru a confirma specificitatea acestora.

În timpul validării, metoda analitică este evaluată în funcție de caracteristicile enumerate mai jos, selectate luând în considerare recomandări model prezentate în tabel:

• specificitate;
• limita detectiei;
• limita de cuantificare;
• zona analitică (interval);
• liniaritatea;
• corectitudine (adevăr);
• precizie (precision);
• robusteţe.

Tabelul 1 - Caracteristicile metodelor determinate în timpul validării

*) poate fi stabilit dacă este necesar;

**) lipsa de specificitate a unei metode analitice poate fi compensată prin utilizarea unei alte metode analitice.

Revalidarea (revalidarea) metodelor se efectuează la schimbarea:

• tehnologii pentru obținerea obiectului de analiză;
• compoziția medicamentului (obiectul analizei);
• metodologie de analiză aprobată anterior.

1. Specificitate

Specificitatea este capacitatea unei tehnici analitice de a evalua fără echivoc un analit în prezența componentelor asociate.

Dovada specificității metodei validate se bazează, de obicei, pe analiza datelor obținute cu utilizarea analizei amestecurilor model de compoziție cunoscută.

Specificitatea metodei care este validată poate fi dovedită și prin prelucrarea statistică adecvată a rezultatelor analizelor obiectelor reale efectuate folosind aceasta și, în paralel, folosind o altă metodă, evident specifică (o metodă a cărei specificitate a fost dovedită).

1.1 Pentru procedurile de testare a autenticității

O metodă validată (sau un set de metode) trebuie să furnizeze informații fiabile despre prezența unei substanțe active date într-o substanță sau într-o formă de dozare, dacă aceasta conține componente prescrise de rețetă, care este supusă confirmării experimentale.

Autenticitatea unei substanțe active într-o substanță farmaceutică sau medicament este stabilită în comparație cu un eșantion standard sau prin fizico-chimice sau proprietăți chimice nu tipic altor componente.

1.2 Pentru procedurile de testare a testelor și impurității

Aceleași abordări sunt utilizate pentru metoda de cuantificare validată și pentru testarea impurităților - trebuie evaluată specificitatea sa pentru analit, adică trebuie confirmat experimental că prezența componentelor însoțitoare nu afectează rezultatul analizei într-un mod neintenționat.

Este permisă evaluarea specificității metodei care este validată atât prin analiza amestecurilor de modele ale unei compoziții cunoscute care conține analitul, cât și prin compararea rezultatelor analizelor obiectelor reale obținute simultan cu utilizarea unei metode validate și a unei alte metode, evident specifice. Rezultatele experimentelor respective ar trebui procesate statistic.

Lipsa de specificitate a testului poate fi compensată printr-un alt test suplimentar.

La validarea metodelor, dacă este cazul, pot fi utilizate probe de medicamente care au fost expuse la condiții extreme (lumină, temperatură, umiditate) în scopul acumulării de impurități sau modificate chimic în orice mod adecvat.

Pentru tehnicile cromatografice, arătați rezoluția dintre cele două substanțe care eluează cel mai bine la concentrații adecvate.

1. LIMITA DETECTIEI

Limita de detecție este cea mai mică cantitate (concentrație) dintr-un analit dintr-o probă care poate fi detectată (sau estimată) folosind o procedură validată.

Limita de detecție în cazurile prezentate în tabel este de obicei exprimată ca concentrația analitului (în% relativ sau părți pe milion - ppm).

În funcție de tipul de tehnică (vizuală sau instrumentală), se utilizează diferite metode pentru a determina limita de detecție.

2.1 Pentru metodele cu o evaluare vizuală a rezultatului analizei

Probele cu diferite cantități cunoscute (concentrații) de analit sunt testate și se stabilește valoarea minimă la care rezultatul analizei poate fi evaluat vizual. Această valoare este o estimare a limitei de detectare.

2.2 Pentru metodele cu evaluare instrumentală a rezultatului analizei

2.2.1 Raportul semnal / zgomot

Această abordare este aplicabilă metodelor pentru care se observă zgomot de bază. Comparați valorile semnalului obținute pentru experimentul de control și pentru probele cu concentrații scăzute de analit. Setați cantitatea minimă (concentrația) de analit din eșantion, la care raportul semnalului analitic la nivelul de zgomot este egal cu 3.

Valoarea găsită este o estimare a limitei de detectare.

2.2.2 Prin valoarea deviației standard a semnalului și panta graficului de calibrare

Limita de detectare (LO) se găsește prin ecuația:

PO = 3.3 S/b,

Unde S

b- coeficientul de sensibilitate, care este raportul dintre semnalul analitic și valoarea determinată (tangenta pantei curbei de calibrare).

Sși b

S S a termenul liber al ecuației acestui grafic. Valoarea obținută a limitei de detecție, dacă este necesar, poate fi confirmată prin experiment direct la cantități (concentrații) de analit apropiate de valoarea găsită a limitei de detecție.

De regulă, dacă există date privind adecvarea unei metode pentru determinarea fiabilă a unei substanțe în concentrații care se situează atât deasupra cât și sub standardul pentru conținutul său stabilit prin specificație, nu este necesar să se determine limita de detecție efectivă pentru o astfel de metodă.

1. LIMITĂ CANTITATIVĂ

Limita de cuantificare este cea mai mică cantitate (concentrație) dintr-o substanță dintr-o probă care poate fi cuantificată folosind o metodă validată cu precizia necesară și precizia intra-laborator (intermediară).

Limita de cuantificare este o caracteristică necesară de validare a metodelor utilizate pentru a evalua cantități mici (concentrații) de substanțe dintr-o probă și, în special, pentru a evalua conținutul de impurități.

În funcție de tipul de tehnică, sunt utilizate următoarele metode pentru a găsi limita de cuantificare.

3.1 Pentru metodele cu o evaluare vizuală a rezultatului analizei

Probele cu diferite cantități cunoscute (concentrații) de analit sunt testate și se stabilește valoarea minimă la care rezultatul analizei poate fi obținut vizual cu precizia necesară și precizia intra-laborator (intermediară).

3.2 Pentru metodele cu evaluare instrumentală a rezultatului analizei

3.2.1 Raportul semnal / zgomot

Setați concentrația minimă a analitului în probă, la care raportul semnalului analitic la nivelul de zgomot este de aproximativ 10: 1.

3.2.2 Prin valoarea deviației standard a semnalului și panta graficului de calibrare

Limita de cuantificare (LQR) este calculată prin ecuația:

PKO = 10 S/b,

Unde S Este abaterea standard a semnalului analitic;

b- coeficientul de sensibilitate, care este raportul dintre semnalul analitic și valoarea determinată.

În prezența datelor experimentale într-o gamă largă a valorii măsurate Sși b poate fi estimat prin metoda celor mai mici pătrate.

Pentru un grafic de calibrare liniar, valoarea S luată egală cu abaterea standard S a termenul liber al ecuației acestui grafic. Valoarea obținută a limitei de determinare cantitativă, dacă este necesar, poate fi confirmată prin experiment direct la cantități (concentrații) de analit apropiate de valoarea găsită a limitei de determinare cantitativă.

în cazul în care există dovezi ale capacității unei metode de a detecta în mod fiabil un analit la o concentrație mai mare sau mai mică decât rata specificată, în general nu este necesar să se determine adevărata limită pentru test.

1. ZONA ANALITICĂ A PROCEDURII

Zona analitică a tehnicii este intervalul dintre valorile superioare și inferioare ale caracteristicilor analitice ale componentei determinate în obiectul analizei (cantitatea, concentrația, activitatea etc.) a acesteia. În acest interval, rezultatele obținute utilizând metoda validată ar trebui să aibă un nivel acceptabil de veridicitate și precizie intra-laborator (intermediar).

Următoarele cerințe sunt impuse dimensiunii ariei analitice a metodelor:

- procedurile de determinare cantitativă ar trebui să fie aplicabile în intervalul de la 80 la 120% din valoarea nominală a caracteristicii analitice care se determină;

- metodele de evaluare a uniformității dozei ar trebui să fie aplicabile în intervalul de la 70 la 130% din doza nominală;

- metodele de testare utilizate în testul de dizolvare ar trebui să fie, în general, aplicabile în intervalul de 50 până la 120% din concentrația preconizată a ingredientului activ în mediul de dizolvare;

- procedurile de testare a purității ar trebui să fie aplicabile în intervalul de la „Limita de cuantificare” sau „Limita de detecție” la 120% din conținutul admisibil al impurității determinate.

Zona analitică a tehnicii poate fi stabilită din gama de date experimentale care satisface modelul liniar.

1. LINEARITATE

Liniaritatea metodei este prezența unei dependențe liniare a semnalului analitic de concentrația sau cantitatea de analit din eșantionul analizat în zona analitică a metodei.

La validarea unei metode, liniaritatea acesteia în zona analitică este verificată experimental prin măsurarea semnalelor analitice pentru cel puțin 5 probe cu cantități sau concentrații diferite de analit. Datele experimentale sunt procesate prin metoda celor mai mici pătrate folosind un model liniar:

y = b · X + A,

NS- cantitatea sau concentrația analitului;

y- amploarea răspunsului;

b- panta;

A- membru liber (OFS "Prelucrarea statistică a rezultatelor unui experiment chimic").

Cantități care trebuie calculate și raportate b, Ași coeficientul de corelație r... În majoritatea cazurilor, se utilizează dependențe liniare care îndeplinesc condiția de 0,99 și numai atunci când se analizează urme, se iau în considerare dependențe liniare, pentru care 0,9.

În unele cazuri, posibilitatea aproximării liniare a datelor experimentale este furnizată numai după transformarea lor matematică (de exemplu, logaritmul).

Pentru unele metode analitice, care, în principiu, nu se pot baza pe o relație liniară între datele experimentale, concentrația sau cantitatea unei substanțe este determinată folosind curbe de calibrare neliniare. În acest caz, graficul dependenței semnalului analitic de cantitatea sau concentrația analitului poate fi aproximat printr-o funcție neliniară adecvată folosind metoda celor mai mici pătrate, care este fezabilă în prezența software-ului validat corespunzător.

1. DREAPTA

Corectitudinea tehnicii se caracterizează prin devierea rezultatului mediu al determinărilor făcute cu utilizarea acesteia de la valoarea luată ca fiind adevărată.

O tehnică validată este considerată corectă dacă valorile presupuse a fi adevărate se încadrează în intervalele de încredere ale rezultatelor analitice medii corespunzătoare obținute experimental folosind această tehnică.

Următoarele abordări sunt aplicabile evaluării corectitudinii tehnicilor de cuantificare:

a) analiza utilizând o metodă validată de materiale de referință sau amestecuri model cu un conținut (concentrație) cunoscut al analitului;

b) compararea rezultatelor obținute folosind metodologia validată și metodologia exemplară, a cărei corectitudine a fost stabilită anterior;

c) luarea în considerare a rezultatelor studierii liniarității metodei care este validată: dacă termenul liber din ecuația dată în secțiunea 5 nu diferă semnificativ statistic de zero, atunci utilizarea unei astfel de metode dă rezultate fără erori sistematice.

Pentru abordările „a” și „b”, este posibil să se prezinte datele obținute sub forma unei ecuații de dependență liniară (regresie) între valorile găsite experimental și valorile adevărate. Pentru această ecuație, sunt testate ipotezele despre egalitatea cu unitatea tangentei unghiului pantei bși dispariția termenului liber A... De regulă, dacă aceste ipoteze sunt recunoscute ca fiind corecte cu un nivel de fiabilitate de 0,05, atunci utilizarea metodei care este validată dă rezultate corecte, adică lipsite de părtinire.

1. PRECIZIE

Precizia unei tehnici se caracterizează prin împrăștierea rezultatelor obținute cu utilizarea ei în raport cu valoarea rezultatului mediu. O măsură a acestei dispersii este deviația standard a rezultatului unei singure determinări, obținută pentru un eșantion suficient de mare.

Precizia este evaluată pentru orice procedură de cuantificare pe baza rezultatelor a cel puțin trei determinări pentru fiecare dintre cele trei niveluri de mărimi determinabile (inferior, mediu și superior) care se află în domeniul analitic al procedurii. Repetabilitatea poate fi, de asemenea, evaluată pentru orice metodă de testare pe baza a cel puțin șase determinări pentru probe cu conținut de analit aproape nominal. În multe cazuri, evaluarea preciziei poate fi efectuată în conformitate cu rezultatele procesării datelor experimentale prin metoda celor mai mici pătrate, așa cum este indicat în monografia generală a farmacopeei „Prelucrarea statistică a rezultatelor unui experiment chimic”.

Precizia trebuie testată pe probe omogene și poate fi evaluată în trei moduri:

- ca repetabilitate (convergență);

- ca precizie în laborator (intermediară);

- ca precizie interlaboratorie (reproductibilitate).

Rezultatele evaluării metodei analitice pentru fiecare dintre opțiunile de precizie sunt de obicei caracterizate prin valoarea corespunzătoare a deviației standard a rezultatului unei determinări separate.

De obicei, atunci când se dezvoltă o tehnică originală, se determină repetabilitatea (repetabilitatea) rezultatelor obținute cu utilizarea acesteia. Dacă este necesar să se includă tehnica dezvoltată în documentația normativă, se determină suplimentar precizia sa intralaboratorie (intermediară). Precizia interlaboratorie (reproductibilitate) a metodei este evaluată atunci când se presupune că este inclusă în proiectul monografiei generale, monografiei sau documentației de reglementare pentru probele standard de farmacopee.

7.1 Repetabilitate (convergență)

Repetabilitatea unei proceduri analitice este evaluată prin rezultate independente obținute în aceleași condiții reglementate în același laborator (același interpret, același echipament, același set de reactivi) într-o perioadă scurtă de timp.

7.2 Precizie în laborator (intermediară)

Precizia intralaboratorie (intermediară) a metodei validate este evaluată în condițiile de funcționare ale unui laborator (zile diferite, interpreți diferiți, echipamente diferite etc.).

7.3 Precizie interlaboratoare (reproductibilitate)

Precizia interlaboratorie (reproductibilitatea) metodei care este validată este evaluată prin testare în diferite laboratoare.

1. DURABILITATE

Stabilitatea unei metode validate este capacitatea de a menține caracteristicile găsite pentru aceasta în condiții optime (nominale), așa cum este dat în tabel, cu mici abateri probabile de la aceste condiții ale analizei.

Robustețea procedurii nu trebuie determinată în raport cu condițiile de testare ușor de controlat. Acest lucru reduce drastic nevoia de studii dedicate de durabilitate.

Stabilitatea ar trebui studiată numai în cazurile în care metoda validată se bazează pe utilizarea metodelor analitice care sunt deosebit de sensibile la condițiile externe, cum ar fi diferite tipuri de cromatografie și analize funcționale. Dacă este necesar, evaluarea stabilității metodologiei se efectuează în stadiul dezvoltării acesteia. Dacă este probabilă o stabilitate scăzută a unei tehnici, verificarea adecvării acesteia se efectuează fără eșec direct în procesul de utilizare practică.

Testarea adecvării sistemului analitic

Testarea adecvării unui sistem analitic este un test al îndeplinirii cerințelor de bază pentru acesta. Sistemul testat pentru adecvare este o colecție de instrumente specifice, reactivi, standarde și probe care trebuie analizate. Cerințele pentru un astfel de sistem sunt de obicei specificate în monografia generală pentru metoda analitică corespunzătoare. Astfel, validarea adecvării sistemului analitic devine o procedură inclusă în procedura de validare.

Prezentarea rezultatelor validării

Protocolul de validare a metodei analitice trebuie să conțină:

- a ei Descriere completa suficient pentru reproducere și reflectarea tuturor condițiilor necesare analizei;

- caracteristici evaluate;

- toate rezultatele primare care au fost incluse în prelucrarea statistică a datelor;

- rezultatele prelucrării statistice a datelor obținute experimental în timpul dezvoltării sau verificării unei metode validate;

- materiale ilustrative, cum ar fi copii ale cromatogramelor obținute prin cromatografie lichidă de înaltă performanță sau cromatografie gazoasă; electroforeetograme, spectre electronice și infraroșii; fotografii sau desene ale cromatogramelor obținute prin strat subțire sau cromatografie pe hârtie; figuri ale curbelor de titrare, grafice de calibrare;

- concluzia privind adecvarea metodei care este validată pentru includere în documentul normativ.

Materialele de validare pentru metodele analitice individuale ar trebui pregătite sub forma unui raport consolidat de validare.

Limita de cuantificare

„... Limita de cuantificare (LOQ) (în determinări analitice): cea mai mică concentrație a unui analit sau analit într-o probă de testare care poate fi cuantificată cu un nivel acceptabil de precizie și încredere, așa cum este demonstrat prin teste de laborator colaborative sau altele adecvate validarea metodei ... "

O sursă:

"PRODUSE ALIMENTARE. METODE DE ANALIZĂ PENTRU DETECTAREA ORGANISMELOR MODIFICATE GENETIC ȘI A PRODUSELOR OBȚINUTE DIN ELOR. CERINȚE GENERALE ȘI DEFINIȚII. GOST R 53214-2008 (ISO 24276: 2006)"

(aprobat prin Ordinul Rostekhregulirovanie din 25.12.2008 N 708-st)

Terminologia oficială... Academic.ru. 2012.

Vedeți care este „Limita de cuantificare” în alte dicționare:

limita de cuantificare- 3.7 limita de cuantificare [LOQ]: o creștere de zece ori a estimării deviației standard a masei unui eșantion. Notă Valoarea LOQ este utilizată ca prag peste care masa ... ...

limita de repetabilitate- 3.7 limită de repetabilitate: Diferența absolută dintre rezultatele valorilor maxime și minime din numărul specificat de măsurători efectuate în condiții de repetabilitate în conformitate cu GOST R ISO 5725 1. Sursa ... Dicționar-carte de referință a termenilor documentației normative și tehnice

limita de reproductibilitate 2.9 limită de reproductibilitate: valoarea sub care, cu o probabilitate de 95%, se află valoarea absolută a diferenței dintre două rezultate ale testului obținute în condiții reproductibile. O sursă … Dicționar-carte de referință a termenilor documentației normative și tehnice

limita repetabilității (convergenței)- 3.11 valoare limită de repetabilitate care nu este depășită cu un nivel de încredere de 95% valoare absolută diferența dintre două măsurători (sau teste) obținute în condiții repetabile ... Dicționar-carte de referință a termenilor documentației normative și tehnice

Limită de precizie intralaboratorie- 3.11 Limita de precizie intra-laborator: Discrepanța absolută a permis o probabilitate presupusă P între două rezultate de analiză obținute în condiții de precizie intra-laborator. O sursă … Dicționar-carte de referință a termenilor documentației normative și tehnice

limita de reproductibilitate R- 2.19.2 limita de reproductibilitate R: valoarea absolută a diferenței dintre două rezultate ale testului în condiții de reproductibilitate (a se vedea 2.19.1) cu un nivel de încredere de 95%. 2.19.1, 2.19.2 (Ediție modificată, titlu = Modificare nr. 1, IUS 12 2002) ... Dicționar-carte de referință a termenilor documentației normative și tehnice

MI 2881-2004: Recomandare. GSE. Tehnici de analiză chimică cantitativă. Proceduri pentru verificarea acceptării rezultatelor analizei- Terminologie MI 2881 2004: Recomandare. GSE. Tehnici de analiză chimică cantitativă. Proceduri pentru verificarea acceptabilității rezultatelor analizei: 3.17 diferență critică: Diferența absolută admisă pentru o probabilitate presupusă de 95% între ... ... Dicționar-carte de referință a termenilor documentației normative și tehnice

GOST R 50779.11-2000: Metode statistice. Managementul calității statistice. Termeni și definiții- Terminologie GOST R 50779.11 2000: Metode statistice. Managementul calității statistice. Termeni și definiții document original: 3.4.3 (superior și inferior) limite de reglementare Bordura pe diagrama de control, peste care limita superioară, ... ... Dicționar-carte de referință a termenilor documentației normative și tehnice

GOST R 50779.10-2000: Metode statistice. Probabilitate și statistici de bază. Termeni și definiții- Terminologie GOST R 50779.10 2000: Metode statistice. Probabilitate și statistici de bază. Termeni și definiții document original: 2.3. (general) populație Ansamblul tuturor unităților luate în considerare. Notă pentru variabilă aleatorie… … Dicționar-carte de referință a termenilor documentației normative și tehnice

RMG 61-2003: Sistem de stat pentru asigurarea uniformității măsurătorilor. Indicatori de acuratețe, corectitudine, precizie a metodelor de analiză chimică cantitativă. Metode de evaluare- Terminologie RMG 61 2003: Sistem de stat pentru asigurarea uniformității măsurătorilor. Indicatori de acuratețe, corectitudine, precizie a metodelor de analiză chimică cantitativă. Metode de evaluare: 3.12 Precizie intra-laborator: Precizie ... Dicționar-carte de referință a termenilor documentației normative și tehnice

Fiecare metodă instrumentală este caracterizată de un anumit nivel de zgomot asociat cu specificul procesului de măsurare. Prin urmare, există întotdeauna o limită de concentrație sub care o substanță nu poate fi deloc detectată în mod fiabil.

Limita detectieiС min, P - cel mai mic conținut la care prezența unei componente cu un anumit nivel de încredere poate fi detectată folosind această metodă.

Limita de detecție poate fi stabilită și de semnalul analitic minim y min, care poate fi distins cu încredere de semnalul experimentului de control - fundal y.

Metodele statistice care utilizează inegalitatea lui Chebyshev au dovedit că cantitativ limita de detecție poate fi determinată folosind expresia

Unde s fundal este abaterea standard a semnalului de fond analitic; S este coeficientul de sensibilitate (uneori denumit pur și simplu „sensibilitate”), caracterizează răspunsul semnalului analitic la conținutul componentei. Coeficientul de sensibilitate este valoarea primului derivat al funcției de calibrare pentru o determinare a concentrației dată. Pentru curbele de calibrare în linie dreaptă, aceasta este tangenta pantei:

(Atenţie: nu confunda factorul de sensibilitateS cu deviație standards!)

Există alte modalități de a calcula limita de detecție, dar această ecuație este utilizată cel mai des.

În analiza chimică cantitativă, se oferă de obicei o gamă de conținuturi determinate sau concentrații. Înseamnă gama de valori a conținutului determinat (concentrații) prevăzut de această metodologie și limitat de limitele inferioare și superioare ale concentrațiilor determinate.

Analiștii sunt mai des interesați de limita inferioară a concentrației determinate cu n sau conținut m n component determinat prin această metodă. Dincolo de limita inferioară a conținutului determinat acceptă de obicei cantitatea minimă sau concentrația care poate fi determinată cu o abatere standard relativă

. .

Exemplu

Concentrația de masă a fierului în soluție a fost determinată prin metoda spectrofotometrică prin măsurarea densităților optice ale soluțiilor colorate ca urmare a reacției interacțiunii ionului Fe 3+ cu acidul sulfosalicilic. Pentru a construi dependența de calibrare, au fost măsurate densitățile optice ale soluțiilor cu concentrații crescute (specificate) de fier tratat cu acid sulfosalicilic.

Densitățile optice ale soluției de referință (experiment de control pentru reactivi, adică fără adăugarea de fier, (fundal) au fost 0,002; 0,000; 0,008; 0,006; 0,003.

calculati limita de detectare a fierului.

Soluţie

1) Ca rezultat al calculelor prin metoda celor mai mici pătrate (a se vedea exemplul pentru sarcina de control nr. 5), se obțin valorile pentru construirea unui grafic de calibrare.

Valorile calculate pentru construirea unui grafic de calibrare

2) Calculăm coeficientul de sensibilitate, adică coeficientul unghiular al dependenței de calibrare (S) conform datelor din tabel.

3) Calculați abaterea standard de fond, ce este 0,0032 unități de densitate optică.

4) Limita de detectare va fi, mg / cm 3

Sarcina de control numărul 6

Determinați limita de detectare a fierului în apă.

Date inițiale : valorile densității optice a fundalului (soluție de referință) la construirea unui grafic de calibrare pentru determinarea fierului au fost 0,003; 0,001; 0,007; 0,005; 0,006; 0,003; 0,001; 0,005. Valorile densităților optice corespunzătoare concentrației de fier în soluție sunt prezentate în tabelul sarcinii de control nr. 5.

Calculați limita de detecție a fierului în mg / cm 3 conform coeficienților de sensibilitate S, calculați pe baza datelor obținute pentru a construi un grafic de calibrare prin metoda celor mai mici pătrate atunci când efectuați sarcina de control nr. 5;

COLEGIUL

SOLUŢIE

În conformitate cu articolul 30 din Tratatul privind Uniunea Economică Eurasiatică din 29 mai 2014 și cu articolul 2 alineatul (2) din Acordul privind principiile și regulile uniforme pentru circulația medicamentelor în Uniunea Economică Eurasiatică din 23 decembrie 2014, Consiliul de administrație al Comisiei Economice Eurasiatice

decis:

1. Aprobarea liniilor directoare anexate pentru validarea metodelor analitice de testare a drogurilor.

(2) Prezenta decizie intră în vigoare la expirarea a 6 luni de la data publicării sale oficiale.

Președinte al Consiliului
Comisia Economică Eurasiatică
T. Sargsyan

Liniile directoare pentru validarea procedurilor analitice pentru testarea medicamentelor

APROBAT DE
Prin decizia Consiliului
Comisia Economică Eurasiatică
din 17 iulie 2018 N 113

I. Dispoziții generale

1. Prezentul ghid definește regulile pentru validarea metodelor analitice de testare a medicamentelor, precum și o listă de caracteristici care trebuie evaluate la validarea acestor metode și care trebuie incluse în dosarele de înregistrare prezentate organismelor autorizate ale statelor membre ale Eurasiei Economice. Uniunea (în continuare, respectiv, statele membre, Uniunea).

2. Scopul validării unei proceduri analitice de testare a medicamentelor este de a documenta adecvarea acesteia la scopul prevăzut.

II. Definiții

3. În sensul prezentului ghid, sunt utilizate concepte care înseamnă următoarele:

"procedură analitică" - o tehnică de testare a medicamentelor, care include descriere detaliata succesiunea acțiunilor necesare efectuării unui test analitic (inclusiv o descriere a preparării probelor de testare, probelor standard, reactivilor, utilizarea echipamentelor, construcția unei curbe de calibrare, formulele de calcul utilizate etc.);

„reproductibilitatea” este o proprietate de precizie în testarea interlaboratoare;

"domeniul de aplicare (zona analitică)" (domeniul) - intervalul dintre cea mai mare și cea mai mică concentrație (cantitate) a unui analit dintr-o probă (inclusiv aceste concentrații), pentru care s-a dovedit că procedeul analitic are un nivel acceptabil de precizie, acuratețe și liniaritate;

"liniaritatea" este o dependență direct proporțională a semnalului analitic de concentrația (cantitatea) analitului din eșantion în domeniul de aplicare (zona analitică) a tehnicii;

„recuperare (recuperare)” (recuperare) - raportul dintre media obținută și valorile reale (de referință), luând în considerare intervalele de încredere corespunzătoare;

„repetabilitate (precizie intra-test)” este precizia unei proceduri atunci când se efectuează teste repetate în aceleași condiții de funcționare (de exemplu, de același analist sau grup de analiști, pe același echipament, cu aceiași aceiași reactivi, etc.) pentru o perioadă scurtă de timp;

„corectitudine” (acuratețe, adevăr) - apropierea dintre valoarea adevărată acceptată (referință) și valoarea primită, care se exprimă prin valoarea deschiderii;

„limită de cuantificare” - cea mai mică cantitate dintr-o substanță dintr-o probă care poate fi cuantificată cu precizie și precizie adecvate;

„limită de detecție” - cea mai mică cantitate de analit dintr-o probă care poate fi detectată, dar nu neapărat cuantificată cu exactitate;

„precizie” este o expresie a apropierii (gradului de dispersie) a rezultatelor (valorilor) între o serie de măsurători efectuate pe probe multiple prelevate din același eșantion omogen în condițiile prescrise;

„precizie intermediară” - influența variațiilor din laborator (zile diferite, analiști diferiți, echipamente diferite, loturi diferite (loturi) de reactivi etc.) asupra rezultatelor testelor de probe identice prelevate din aceeași serie;

„specificitate” - capacitatea unei tehnici analitice de a evalua fără echivoc substanța care urmează să fie determinată independent de alte substanțe (impurități, produse de degradare, excipienți, matrice (mediu) etc.) prezente în proba de testare;

„robustețe” - capacitatea unei proceduri analitice de a fi robustă la efectele unor mici modificări specificate în condiții de testare, ceea ce indică robustețea sa în utilizarea de rutină (standard).

III. Tipuri de proceduri analitice care urmează să fie validate

4. Acest ghid discută abordările validării celor mai frecvente 4 tipuri de proceduri analitice:

a) teste de identificare (autenticitate);

b) teste pentru determinarea conținutului cantitativ al impurităților (teste cantitative pentru conținutul de impurități);

c) teste pentru determinarea conținutului limitativ al impurităților din eșantion (teste limită pentru impuritățile de control);

d) teste cantitative ale fragmentului activ pentru a determina partea activă a moleculei de substanță activă din proba de testare.

5. Toate metodele analitice utilizate pentru controlul calității medicamentelor trebuie validate. Acest ghid nu acoperă validarea metodelor analitice pentru tipurile de teste care nu sunt incluse în paragraful 4 al acestui ghid (de exemplu, teste de dizolvare sau determinarea dimensiunii particulelor (dispersia) unei substanțe farmaceutice etc.).

6. Testele de identificare (autenticitate) constau, de regulă, în comparație cu proprietățile (de exemplu, caracteristicile spectrale, comportamentul cromatografic, reactivitatea etc.) ale materialelor de testare și de referință.

7. Testele pentru cuantificarea impurităților și testele pentru determinarea limitei de impurități dintr-o probă au ca scop descrierea corectă a caracteristicilor purității probei. Cerințele pentru validarea metodelor pentru determinarea cantitativă a impurităților sunt diferite de cerințele pentru validarea metodelor pentru determinarea conținutului limitativ al impurităților dintr-un eșantion.

8. Procedurile de testare cantitative vizează măsurarea conținutului unui analit dintr-o probă de testare. În acest Ghid, cuantificarea se referă la măsurarea cantitativă a principalelor componente ale unei substanțe farmaceutice. Parametri de validare similari se aplică cuantificării ingredientului activ sau a altor ingrediente. medicament... Parametrii de validare a testului pot fi utilizați în alte proceduri analitice (de exemplu, testarea dizolvării).

Scopul procedurilor analitice ar trebui să fie clar definit, deoarece acest lucru determină alegerea caracteristicilor de validare care ar trebui evaluate în timpul validării.

9. Următoarele caracteristici tipice de validare ale unei proceduri analitice trebuie evaluate:

a) acuratețe (adevăr);

b) precizie:

repetabilitate;

precizie intermediară (intralaboratorie);

c) specificitate;

d) limita de detectare;

e) limita de cuantificare;

f) liniaritatea;

g) domeniul de aplicare (zona analitică).

10. Cele mai importante caracteristici de validare pentru validare tipuri diferite tehnicile analitice sunt date în tabel.

Masa. Caracteristici de validare pentru validarea diferitelor tipuri de proceduri analitice

________________
* Dacă se determină reproductibilitatea, nu este necesară precizia intermediară.

** Lipsa specificității unei metode analitice poate fi compensată prin utilizarea uneia sau mai multor metode analitice suplimentare.

*** Poate fi necesar în unele cazuri (de exemplu, când limita de detectare și limita normalizată pentru conținutul impurității detectate sunt aproape).

Notă. "-" - caracteristica nu este evaluată, "+" - caracteristica este evaluată.


Lista specificată trebuie considerată tipică pentru validarea procedurilor analitice. Sunt posibile excepții care necesită o justificare separată de către producătorul medicamentului. O astfel de caracteristică a unei tehnici analitice, cum ar fi stabilitatea (robustețea), nu este prezentată în tabel, dar ar trebui luată în considerare în etapa adecvată a dezvoltării unei tehnici analitice.

Revalidarea (revalidarea) poate fi necesară în următoarele cazuri (dar nu se limitează la acestea):

schimbarea schemei pentru sinteza unei substanțe farmaceutice;

modificări ale compoziției medicamentului;

schimbarea metodologiei analitice.

Revalidarea nu se efectuează dacă justificarea este furnizată de producător. Măsura revalidării depinde de natura modificărilor introduse.

IV. Metodologia de validare a procedurilor analitice

1. Cerințe generale pentru metodologia de validare a metodelor analitice

11. Această secțiune rezumă caracteristicile care trebuie luate în considerare la validarea metodelor analitice și prezintă câteva abordări și recomandări pentru stabilirea diferitelor caracteristici de validare ale fiecărei metode analitice.

12. În unele cazuri (de exemplu, când se dovedește specificitatea), se poate utiliza o combinație de mai multe metode analitice pentru a asigura calitatea unei substanțe farmaceutice sau a unui produs medicamentos.

13. Toate datele relevante colectate în timpul validării și formulele utilizate pentru calcularea caracteristicilor de validare ar trebui prezentate și analizate.

14. Pot fi utilizate alte abordări decât cele prezentate în acest Ghid. Solicitantul este responsabil pentru selectarea procedurii de validare și a protocolului. În acest caz, scopul principal al validării unei metode analitice este confirmarea adecvării metodei pentru scopul propus. Datorită complexității lor, abordările procedurilor analitice pentru produsele biologice și biotehnologice pot diferi de cele descrise în acest ghid.

15. Pe parcursul studiului de validare, ar trebui utilizate materiale de referință cu caracteristici cunoscute și documentate. Puritatea necesară a materialelor de referință depinde de utilizarea intenționată.

16. Diverse caracteristici de validare sunt discutate în subsecțiuni separate ale acestei secțiuni. Structura acestei secțiuni reflectă progresul procesului de dezvoltare și evaluare a metodelor analitice.

17. Lucrările experimentale ar trebui planificate astfel încât caracteristicile relevante de validare să fie studiate simultan, oferind date fiabile cu privire la capacitățile procedurii analitice (de exemplu, specificitate, liniaritate, domeniul de aplicare, veridicitate și precizie).

2. Specificitate

18. Studiile de specificitate ar trebui efectuate în timpul validării testelor de identificare, impuritate și cuantificare. Procedurile de confirmare a specificității depind de utilizarea intenționată a metodei analitice.

19. Metoda de confirmare a specificității depinde de sarcinile pentru care este destinată metoda analitică. Nu în toate cazurile este posibil să se confirme că metoda analitică este specifică pentru un anumit analit (selectivitate completă). În acest caz, se recomandă utilizarea unei combinații de 2 sau mai multe metode analitice.

Lipsa specificității unei tehnici analitice poate fi compensată prin utilizarea uneia sau mai multor tehnici analitice suplimentare.

20. Specificitatea pentru diferite tipuri de teste înseamnă următoarele:

a) la testarea pentru identificare - confirmare că procedura permite identificarea analitului;

b) la testarea impurităților - confirmare că tehnica vă permite să recunoașteți corect impuritățile din probă (de exemplu, un test pentru compuși înrudiți, metale grele, conținutul de solvenți reziduali etc.);

c) în teste cantitative - confirmarea faptului că tehnica vă permite să stabiliți conținutul sau activitatea analitului în eșantion.

Identificare

21. Un test de identificare satisfăcător ar trebui să poată face distincția între compușii strâns legați de structură care ar putea fi prezenți în probă. Selectivitatea unei proceduri analitice poate fi confirmată prin obținerea de rezultate pozitive (posibil prin comparație cu o probă standard cunoscută) pentru probele care conțin analitul și rezultate negative pentru probele care nu îl conțin.

22. Pentru a confirma absența rezultatelor fals pozitive, se poate efectua un test de identificare pentru substanțe cu o structură similară sau substanțe care însoțesc analitul.

23. Alegerea substanțelor care pot interfera cu testul ar trebui justificată.

Test de cuantificare și impuritate

24. La confirmarea specificității unei proceduri analitice utilizând metoda de separare cromatografică, ar trebui prezentate cromatograme reprezentative cu identificarea corespunzătoare a componentelor individuale. Este necesar să se utilizeze abordări similare cu alte tehnici bazate pe separare.

25. Separările critice în cromatografie ar trebui studiate la nivelul adecvat. În cazul separărilor critice, trebuie stabilită rezoluția celor 2 componente care eluează cel mai bine.

26. Atunci când se utilizează o metodă de cuantificare nespecifică, ar trebui utilizate metode analitice suplimentare și trebuie confirmată specificitatea întregului set de metode. De exemplu, dacă determinarea cantitativă se efectuează în timpul eliberării unei substanțe farmaceutice metoda titrimetrică poate fi completat cu un test de impuritate adecvat.

27. Abordarea este aceeași atât pentru cuantificare, cât și pentru testarea impurității.

Prezența probelor de impurități

28. În prezența eșantioanelor de impurități, determinarea specificității procedurii analitice este următoarea:

a) pentru determinarea cantitativă, este necesar să se confirme selectivitatea determinării substanței în prezența impurităților și (sau) a altor componente ale probei. În practică, acest lucru se realizează prin adăugarea la probă (substanță farmaceutică sau medicament) a impurităților și (sau) excipienților în cantitatea adecvată și dacă există dovezi ale absenței lor de influență asupra rezultatului determinării cantitative a substanței active;

b) la testarea impurităților, specificitatea poate fi stabilită prin adăugarea de impurități la o substanță farmaceutică sau la un produs medicamentos în anumite cantități și dacă există dovezi ale separării acestor impurități între ele și (sau) de alte componente ale probei.

Fără probe de impurități

29. Dacă nu există probe standard de impurități sau produse de degradare, specificitatea poate fi confirmată prin compararea rezultatelor testelor probelor care conțin impurități sau produse de degradare cu rezultatele unei alte metode validate (de exemplu, un farmacopeu sau altul validat analitic (independent ) metoda). După caz, materialele de referință pentru impurități ar trebui să includă probe care au fost depozitate în condiții de solicitare specificate (lumină, căldură, umiditate, hidroliză acidă (bazică) și oxidare).

30. În cazul cuantificării, este necesar să se compare cele 2 rezultate.

31. În cazul testării impurității, este necesar să se compare profilurile de impuritate.

32. Pentru a demonstra corespondența vârfului analitului cu o singură componentă, este recomandabil să se efectueze studii privind puritatea vârfurilor (de exemplu, utilizarea detecției matrice de diode, spectrometrie de masă).

3. Liniaritatea

33. Relația liniară ar trebui evaluată pe întreaga gamă de aplicare a metodei analitice. Poate fi confirmat direct pe o substanță farmaceutică (prin diluarea soluției standard principale) și (sau) pe porțiuni separate cântărite de amestecuri artificiale (model) de componente medicamentoase utilizând metoda propusă. Ultimul aspect poate fi studiat în cursul determinării domeniului de aplicare (zona analitică) a metodei.

34. Liniaritatea este evaluată vizual prin reprezentarea semnalului analitic în funcție de concentrația sau cantitatea de analit. Dacă există o relație liniară clară, rezultatele obținute ar trebui procesate prin metode statistice adecvate (de exemplu, prin calcularea unei linii de regresie utilizând metoda celor mai mici pătrate). Conversia matematică a rezultatelor testului poate fi necesară pentru a obține liniaritatea între rezultatele testului și concentrațiile eșantionului înainte de analiza de regresie. Rezultatele analizei liniei de regresie pot fi utilizate pentru a evalua matematic gradul de liniaritate.

35. În absența liniarității, datele testului ar trebui transformate matematic înainte de analiza de regresie.

36. Pentru a confirma liniaritatea, trebuie determinate și prezentate coeficientul de corelație sau coeficientul de determinare, interceptarea de regresie liniară, panta de regresie și suma reziduală a pătratelor abaterilor și trebuie atașat un grafic cu toate datele experimentale.

37. Dacă nu se observă liniaritatea pentru niciun fel de transformări matematice (de exemplu, la validarea metodelor imunoanalitice), semnalul analitic trebuie descris utilizând funcția corespunzătoare a concentrației (cantității) analitului din eșantion.

V. Domeniul de aplicare (zona analitică)

39. Domeniul de aplicare a metodei analitice depinde de scopul acesteia și este determinat în studiul liniarității. În cadrul domeniului de aplicare, procedura ar trebui să furnizeze liniaritatea, corectitudinea și precizia necesare.

40. Următoarele domenii de aplicare (domenii analitice) ale metodelor analitice ar trebui considerate ca fiind minim acceptabile:

a) pentru determinarea cantitativă a unei substanțe active într-o substanță farmaceutică sau produs medicamentos - de la o concentrație (conținut) de 80 la sută la o concentrație (conținut) de 120 la sută din concentrația nominală (conținut);

b) pentru uniformitatea dozei - de la o concentrație (conținut) de 70 la sută la o concentrație (conținut) de 130 la sută, dacă o gamă mai largă nu este justificată pentru medicament în funcție de forma de dozare (de exemplu, inhalatoare cu doză măsurată) );

c) pentru testarea dizolvării - ± 20 la sută (absolut) din domeniul nominal de utilizare. De exemplu, dacă specificațiile pentru o formulare cu versiune modificată acoperă o zonă de la 20 la sută în prima oră la 90 la sută din conținutul declarat în 24 de ore, domeniul de utilizare validat ar trebui să fie de la 0 la 110 la sută din conținutul declarat;

d) pentru determinarea impurităților - de la limita de detectare a unei impurități la valoarea de 120% specificată în caietul de sarcini;

e) Pentru impuritățile care sunt extrem de puternice sau au efecte farmacologice toxice sau neprevăzute, limita de detecție și limita de cuantificare ar trebui să fie proporționale cu nivelul la care aceste impurități trebuie controlate. Pentru a valida procedurile de testare a impurității utilizate în timpul dezvoltării, poate fi necesar să setați domeniul analitic lângă limita presupusă (posibilă);

f) dacă cuantificarea și puritatea sunt studiate simultan folosind același test și se folosește doar 100% standard, relația liniară ar trebui să fie pe întreaga gamă de aplicare a procedurii analitice, începând de la pragul de raportare pentru impuritate (în conformitate cu reguli pentru studierea impurităților în medicamenteși stabilirea cerințelor pentru acestea în specificațiile aprobate de Comisia Economică Eurasiatică) până la 120% conținut specificat în caietul de sarcini pentru determinarea cantitativă.

Vi. Dreapta

41. Acuratețea ar trebui stabilită pentru întreaga gamă de aplicare a procedurii analitice.

1. Determinarea cantitativă a ingredientelor farmaceutice active

Substanță farmaceutică

42. Pot fi utilizate mai multe metode de evaluare a corectitudinii:

aplicarea unei tehnici analitice la un analit cu un grad cunoscut de puritate (de exemplu, la un material standard);

compararea rezultatelor analizei obținute utilizând o metodă analitică validată și a rezultatelor obținute utilizând o metodă cunoscută a fi corectă și / sau o metodă independentă.

Corectitudinea poate fi concluzionată după ce au fost stabilite precizia, linearitatea și specificitatea.

Medicament

43. Pot fi utilizate mai multe metode de evaluare a corectitudinii:

aplicarea unei tehnici analitice la amestecuri artificiale (model) de componente ale unui medicament, la care s-a adăugat o cantitate prestabilită de analit;

în absența eșantioanelor tuturor componentelor medicamentului, este posibil să se adauge o cantitate predeterminată de substanță farmaceutică la medicament sau să se compare rezultatele obținute utilizând o altă tehnică, a cărei corectitudine este cunoscută și (sau) o tehnică independentă.

Concluzia despre corectitudine poate fi făcută după determinarea preciziei, liniarității și specificității.

2. Cuantificarea impurităților

44. Precizia se determină pe probe (substanță farmaceutică și produs medicamentos), la care s-a adăugat o cantitate cunoscută de impurități.

45. În absența eșantioanelor de impurități determinate și (sau) produse de degradare, este acceptabil să se compare rezultatele cu rezultatele obținute folosind o metodă independentă. Este permisă utilizarea semnalului analitic al substanței active.

46. ​​Ar trebui specificat un mod specific de exprimare a conținutului impurităților individuale sau a sumelor acestora (de exemplu, în procente de masă sau în procente în raport cu aria de vârf, dar în toate cazurile în raport cu analitul principal).

47. Precizia este evaluată pentru cel puțin 9 determinări a 3 concentrații diferite care acoperă întregul domeniu de aplicare (adică 3 concentrații și 3 replici pentru fiecare concentrație). Definițiile ar trebui să includă toate etapele metodologiei.

48. Acuratețea se exprimă prin valoarea deschiderii în procente în funcție de rezultatele determinării cantitative a unei substanțe adăugate într-o cantitate cunoscută la proba analizată sau diferența dintre media obținută și valorile reale (de referință), luând în considerare ia în considerare intervalele de încredere corespunzătoare.

Vii. Precizie

49. Validarea testelor de testare și impuritate implică determinarea preciziei.

50. Precizia este setată la 3 niveluri: repetabilitate, precizie intermediară și reproductibilitate. Precizia trebuie stabilită folosind probe omogene, autentice. Dacă este imposibil să se obțină o probă omogenă, este permisă determinarea preciziei folosind probe preparate artificial (model) sau o soluție de probă. Precizia unei proceduri analitice este de obicei exprimată în termeni de varianță, deviație standard sau coeficient de variație a unei serii de măsurători.

VIII. Repetabilitate

51. Repetabilitatea este determinată prin efectuarea a cel puțin 9 determinări ale concentrațiilor în intervalul de aplicare a metodei analitice (3 concentrații și 3 replici pentru fiecare concentrație) sau cel puțin 6 determinări ale concentrației pentru probele cu conținut de analit 100%.

IX. Precizie intermediară (intra-laborator)

52. Gradul în care se stabilește precizia intermediară depinde de condițiile în care este utilizată procedura analitică. Solicitantul trebuie să stabilească efectul factorilor aleatori asupra preciziei procedurii analitice. Variabilele tipice de investigat sunt zile diferite, analiști, echipamente etc. Nu este nevoie să studiați aceste influențe separat. Când se studiază influența diferiților factori, este de preferat să se utilizeze proiectarea experimentală.

X. Reproductibilitatea

53. Reproductibilitatea se referă la precizia dintr-un experiment interlaborator. Reproductibilitatea trebuie determinată în cazul standardizării metodei analitice (de exemplu, atunci când este inclusă în Farmacopeea Uniunii sau în Farmacopeea statelor membre). Nu este necesară includerea datelor de reproductibilitate în dosarul de înregistrare.

XI. Prezentarea datelor

54. Pentru fiecare tip de precizie, trebuie indicate abaterea standard, abaterea standard relativă (coeficientul de variație) și intervalul de încredere.

XII. Limita detectiei

55. Există diferite abordări pentru determinarea limitei de detecție, în funcție de faptul dacă tehnica este instrumentală sau neinstrumentală. Sunt permise și alte abordări.

XIII. Evaluare vizuală

56. Evaluarea vizuală poate fi utilizată atât pentru tehnici neinstrumentale, cât și pentru tehnici instrumentale. Limita de detecție se stabilește prin analizarea probelor cu concentrații cunoscute ale analitului și determinarea conținutului său minim la care este detectat în mod fiabil.

XIV. Evaluarea limitei de detecție în ceea ce privește raportul semnal-zgomot

57. Această abordare se aplică numai procedurilor analitice pentru care se observă zgomot de bază.

58. Determinarea raportului semnal-zgomot se realizează prin compararea semnalelor obținute din probe cu concentrații scăzute cunoscute cu semnalele obținute din probe goale și stabilirea concentrației minime la care analitul poate fi detectat în mod fiabil. Un raport semnal-zgomot de 3: 1 la 2: 1 este considerat acceptabil pentru estimarea limitei de detecție.

XV. Evaluarea limitei de detecție de la abaterea standard a semnalului analitic și panta curbei de calibrare

59. Limita de detecție (LOD) poate fi exprimată după cum urmează:

Unde:

60. Valoarea k se calculează din curba de calibrare pentru analit. Estimarea lui s se poate face în mai multe moduri:

b) de-a lungul curbei de calibrare. Analizați curba de calibrare rezultată reprezentată grafic pentru eșantioane cu un conținut de analit apropiat de limita de detecție. Abaterea standard reziduală a liniei de regresie sau abaterea standard a punctului de intersecție cu axa ordonată (abaterea standard a interceptării de regresie liniară) poate fi utilizată ca deviație standard.

XVI. Prezentarea datelor

61. Este necesar să se indice limita de detecție și metoda de determinare a acesteia. Dacă determinarea limitei de detecție se bazează pe evaluarea raportului vizual sau semnal-zgomot, prezentarea cromatogramelor relevante este considerată suficientă pentru a o justifica.

62. În cazul în care valoarea limitei de detecție este obținută prin calcul sau extrapolare, estimarea ar trebui confirmată prin testarea independentă a unui număr suficient de probe cu conținutul analitului, corespunzător sau aproape de limita de detecție.

XVII. Limita de cuantificare

63. Limita de cuantificare este o caracteristică necesară de validare a metodelor utilizate pentru a determina conținutul redus de substanțe dintr-o probă, în special pentru determinarea impurităților și (sau) a produselor de degradare.

64. Sunt posibile mai multe abordări pentru determinarea limitei de cuantificare, în funcție de tehnica instrumentală sau neinstrumentală. Sunt permise alte abordări.

XVIII. Evaluare vizuală

65. Evaluarea vizuală poate fi utilizată atât pentru tehnici neinstrumentale, cât și pentru instrumentale.

66. Limita cuantificării se stabilește de obicei prin analiza eșantioanelor cu concentrații cunoscute de analit și estimarea nivelului minim la care analitul poate fi cuantificat cu precizie și precizie acceptabile.

XIX. Evaluarea limitei de cuantificare semnal-zgomot

67. Această abordare se aplică numai metodelor de măsurare în care se observă zgomotul de bază.

68. Determinarea raportului semnal-zgomot se realizează prin compararea semnalelor măsurate obținute din probe cu concentrații scăzute cunoscute ale analitului cu semnalele obținute din probele goale și stabilirea concentrației minime la care analitul poate fi fiabil. cuantificat. Raportul tipic semnal-zgomot este 10: 1.

XX. Estimarea limitei de cuantificare de la abaterea standard a semnalului și panta curbei de calibrare

69. Limita de cuantificare (LQR) poate fi exprimată după cum urmează:

Unde:

s este abaterea standard a semnalului analitic;

k este tangenta pantei curbei de calibrare.

70. Valoarea k se calculează din curba de calibrare pentru analit. Estimarea lui s se poate face în mai multe moduri:

a) prin deviația standard a eșantionului gol. Semnalul analitic este măsurat pentru un număr suficient de goluri și se calculează abaterea standard a valorilor acestora;

b) de-a lungul curbei de calibrare. Analizați curba de calibrare rezultată pentru probe cu un analit aproape de limita de cuantificare. Abaterea standard reziduală a liniei de regresie sau abaterea standard a punctului de intersecție cu axa ordonată (abaterea standard a interceptării de regresie liniară) poate fi utilizată ca deviație standard.

XXI. Prezentarea datelor

71. Este necesar să se indice limita cuantificării și metoda de determinare a acesteia.

72. Limita de cuantificare ar trebui ulterior confirmată prin analiza unui număr suficient de probe cu un conținut de analit egal sau aproape de limita de cuantificare.

73. Alte abordări decât cele enumerate mai sus pot fi acceptabile.

XXII. Stabilitate (robustete)

74. Studiul stabilității (robusteții) trebuie efectuat în etapa de dezvoltare, cantitatea de cercetare depinde de metodologia analitică luată în considerare. Este necesar să se arate fiabilitatea analizei cu variații deliberate ale parametrilor (condițiilor) metodei.

75. Dacă rezultatele măsurătorilor depind de modificările condițiilor de aplicare a procedurii analitice, este necesar să se monitorizeze cu strictețe respectarea acestor condiții sau să se prevadă măsurile de precauție în timpul testului.

76. Pentru a se asigura că metoda analitică este menținută atunci când este utilizată, o consecință a unui studiu de rezistență ar trebui să fie stabilirea unei serii de parametri de adecvare a sistemului (de exemplu, un test de rezoluție).

77. Variațiile comune ale parametrilor sunt:

stabilitatea soluțiilor utilizate în procedurile analitice;

timpul de extracție.

Parametrii de variație pentru cromatografia lichidă sunt:

schimbarea pH-ului fazei mobile;

schimbarea compoziției fazei mobile;

coloane diferite (diferite serii și furnizori);

temperatura;

viteza fazei mobile (debit).

Parametrii de variație pentru cromatografia gazoasă sunt:

coloane diferite (diferite serii și furnizori);

temperatura;

viteza gazului purtător.

XXIII. Evaluarea adecvării sistemului

78. Evaluarea adecvării sistemului este o parte integrantă a multor tehnici analitice. Aceste teste se bazează pe conceptul pe care îl constituie echipamentul, electronica, operațiile analitice și probele analizate un sistem integralși necesită o evaluare ca atare. Criteriile de adecvare a sistemului ar trebui stabilite pentru o metodă specifică și depind de tipul de metodă analitică validată. Informații suplimentare pot fi găsite în Farmacopeea Uniunii sau în Farmacopeile statelor membre.



Textul electronic al documentului
pregătit de SA „Kodeks” și verificat de:
site-ul oficial
Uniunea Economică Eurasiatică
www.eaeunion.org, 20.07.2018